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在初中阶段,蛋白质的检验主要采用 双缩脲法,该方法操作简单、快速,适合基础实验教学。以下是具体步骤和要点:
一、双缩脲法原理
双缩脲试剂由 双缩脲试剂A(0.1g/mL NaOH)和 双缩脲试剂B(0.01g/mL CuSO₄)组成。蛋白质在碱性环境中与铜离子发生紫色络合反应,从而检测蛋白质的存在。
二、实验步骤
取少量组织样液或蛋清等已知含蛋白质的样本,置于试管中。
试剂配制与反应
- 先加入双缩脲试剂A(NaOH),充分振荡营造碱性环境;
- 再缓慢加入双缩脲试剂B(CuSO₄),继续摇匀。
结果观察
若样本中存在蛋白质,溶液会呈现 紫色,形成紫色的络合物。
三、注意事项
试剂浓度:
需严格按比例配制,避免影响反应结果;
操作顺序:A液先加,B液后加,不可颠倒;
对比实验:建议设置空白对照(未加样本的NaOH溶液),排除试剂干扰。
四、其他相关方法(拓展)
紫外吸收法:通过测量蛋白质对280nm波长光的吸收度定量分析,灵敏度高但操作较复杂;
酚试剂法:与双缩脲法类似,但颜色反应更明显,适合定性检测。
以上方法中,双缩脲法因操作简便、结果直观,是初中化学实验中常用的蛋白质检测手段。